当前位置：信函范文网>范文大全 > 公文范文 >

土壤微生物知识,菁选3篇（范例推荐）

时间：2023-04-08 15:10:16 来源：网友投稿

土壤微生物的知识1　　土壤微生物的.分离和纯化　　一、实验目的　　1、掌握从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法。　　2、学会根据微生物培养特征初步判断未知菌的类别。　　3、练习微生物接种、移植和培养下面是小编为大家整理的土壤微生物知识,菁选3篇（范例推荐）,供大家参考。

土壤微生物知识,菁选3篇（范例推荐）

土壤微生物的知识1

　　土壤微生物的.分离和纯化

　　一、实验目的

　　1、掌握从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法。

　　2、学会根据微生物培养特征初步判断未知菌的类别。

　　3、练习微生物接种、移植和培养的基本技术，掌握无菌操作技术。

　　二、实验原理

　　土壤是微生物生长和栖息的良好基地。土壤具有绝大多数微生物生活所需的各种条件，是自然界微生物生长繁殖的良好基地。因此，土壤是微生物资源的巨大宝库。

　　牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，可用于培养细菌。链霉素可以抑制细菌和放线菌的生长，对酵母菌和霉菌不起作用。

　　加入一定量链霉素的培养基可以从混杂的微生物群体中分离出酵母菌和霉菌。重*钾或苯酚对土壤真菌、细菌有明显的抑制作用，可用于选择分离放线菌。

　　三、实验器材

　　1、材料：10cm左右深层土壤。

　　2、培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基

　　3、其他物品：试管、三角瓶、烧杯、量筒、电子天*、精密pH试纸、培养皿、高压蒸汽灭菌锅、移液枪、枪头、接种环、酒精灯、链霉素（1万单位/ml）、10%苯酚、无菌水。

　　四、实验步骤

　　1、土样采集：取10cm左右深层土壤10g备用。

　　2、制备土壤稀释液：称取土壤1g，放入有99mL无菌水的三角瓶中，振荡均匀，即为稀释10－2的土壤悬液。然后进行十倍梯度稀释，依次制备10－3、10－4、10－5、10－6、10－7稀释度的土壤稀释液。

　　3、培养基*板制备：按培养基配方各配置牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基各100ml。灭菌后分别倒3个*板。（高氏Ⅰ号培养基灭菌前加入10滴10%苯酚；马丁氏培养基倒*板前加入2ml去氧胆酸钠（2%）和0。4ml1万单位/ml链霉素）

　　4、接种：用无菌吸管吸取0。1ml相应浓度土壤稀释液，以无菌操作技术接种在*板上，涂布均匀。细菌选用10－4、10－5、10－6三个稀释度接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，放线菌与霉菌选用10－2、10－3、10－4三个稀释度，分别接种于高氏Ⅰ号培养基、马丁氏培养基。（一个稀释度一个*板）

　　5、培养：细菌*板于37℃恒温培养1～2d，放线菌于30℃培养2～3d，霉菌于30℃培养3～5d，观察。

　　6、计数：用稀释水样检测*板的菌落计数方法进行计数，报告细菌总数/（CFU·ml—1）

　　7、纯化：挑取典型菌落接种于相应*板，培养条件同上，培养纯化。

　　五、思考题

　　1、分离放线菌和真菌为什么需要分别加重*钾和链霉素？

　　2、怎么检验培养皿上的某个单菌落是不是纯培养？

土壤微生物的知识2

　　土壤微生物的采集一般有土样采集、增殖培养、培养分离、筛选最后进行纯种分离、毒性试验等。

　　1、采样：

　　一般在有机质较多的肥沃土壤中，微生物的数量最多，中性偏碱的土壤以细菌和放线菌为主，酸性红土壤及森林土壤中霉菌较多，果园、菜园和野果生长区等富含碳水化合物的土壤和沼泽地中，酵母和霉菌较多。选择一定的土壤环境采集土样，将采集到的土样盛入清洁的聚乙烯袋、牛皮袋或玻璃瓶中。

　　2、增殖培养：

　　为了容易分离到所需的菌种，让无关的微生物至少是在数量上不要增加，可以通过配制选择性培养基，选择一定的培养条件来控制。例如碳源利用的控制，可选定糖，淀粉，纤维素，或者石油等，以其中的一种为唯一碳源，那么只有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长，而其它微生物就可能死亡或淘汰。这样对下阶段的纯种分离就会顺利得多。

　　3、培养分离：

　　尽管通过增殖培养效果显著，但还是处于微生物的混杂生长状态。因此还必须分离，纯化。在这—步，增殖培养的选择性控制条件还应进一步应用，而且控制得细一点，好一点。纯种分离的方法有划线分离法，稀释分离法。

　　4、筛选：

　　这一步是采用与生产相近的培养基和培养条件，通过三角瓶的容量进行小型发酵试验，以求得适合于工业生产用菌种。

　　关于菌种的识别，细菌、放线菌、酵母菌和霉菌，每一类微生物在一定培养条件下形成的菌落各具有某些相对的特征，利用观察这些特征，来区分各大类微生物及初步识别、鉴定微生物。

　　土壤

　　一般取土壤表层5—10cm处土壤，如果土壤有翻动，应更深一点，避免空气中微生物污染。

　　1、我们一般都用那种封口袋（塑料的），纸袋不容易保持水分。

　　2、当天采当天快递回来，不用加冰袋。

　　3、快递一般三天就到，对微生物菌群影响不大。

　　4、在冰柜中4度保存，时间不要超过一个月，尽量随采随做。菌株分离（seperation）就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开，并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对它们进行分离、筛选，进而得到所需的微生物的过程。

　　工业微生物产生菌的筛选一般包括两大部分：一是从自然界分离所需要的菌株，二是把分离到的野生型菌株进一步纯化并迸行代谢产物鉴别。

　　菌种可从以下几个途径进行收集和筛选：

　　（1）向菌种保藏机构和个人索取有关的菌株，从中筛选所需菌株。国内外著名的菌种保藏机构有：微生物菌种保藏管理委员会（CCCCM），美国典型菌种保藏中心（ATTC），英国国家典型菌种保藏所（NCTC），日本的大阪发酵研究所（IFO）等。

　　（2）由自然界采集样品，如土壤、水、动植物体等，从中进行分离筛选。

　　（3）从一些发酵制品中分离回的菌株，如从酱油中分离蛋白酶产生菌，从酒糟中分离淀粉酶或糖化酶的产生曲等。该类发酵制品经过长期的自然选样，具有悠久的历史，从这些传统产品中容易筛选到理想的菌株。

　　菌株的分离和筛选一般可分为：采样、富集、分离、产物鉴别、生化鉴定几个步骤。

　　一、从土壤中采样

　　1克土壤的含菌量大体有如下的递减规律：细菌（108）＞放线菌（107）＞霉菌（106）＞酵母菌（105）＞藻类（104）＞原生动物（103）

　　（一）根据土壤特点

　　1．土壤有机质含量和通气状况

　　采土样最好的上层是5—25cm、一般每克上中含菌数约几十万到几十亿个，并且各种类型的细菌和放线菌几乎都能分离到。总的来说酵母菌分布土层最浅，约5—10cm；霉菌和好氧芽孢杆菌也分布在浅土层。

　　2．土壤的酸碱度和植被状况

　　3．地理条件：南方、北方

　　4．季节条件：7—10月

　　（二）采样方法

　　用取样铲，将表层5cm左右的浮土除去，取5—25cm处的土样10—25g，装入事先准准备好的塑料袋内扎好、北方土壤干燥．在10—30cm处取样。给塑料袋编号并记录地点、土壤土质、植被名称、时间及其他环境条件。一般样品取回后应马上分离。以免微生物死亡。但有时样品较多，或到外地取样，路途遥远，难以做到及时分离，则可采先用选择性培养基做好试管斜面，随身带走。到一处将取好的土样混匀，取3—4g撒到试管斜面上．这样可避免菌株因不能及时分离而死亡。

　　二、根据微生物生理特点取样

　　1．根据微生物的营养类型

　　每种微生物对碳、氮源的需求不一样，分布也有差异。若需要筛选代谢合成某种化合物的微生物，从大量使用、生产或处理这种化合物的工厂附近采集样品，容易得到满意的效果。不少微生物对碳源的`利用是不完全专一的，如以油脂为碳源的某些脂肪酶产生菌同样也可以分解淀粉获得能源而生长。

　　2．跟据微生物的生理特性

　　三、特殊环境下采样

　　1．局部环境条件的影响

　　2．极端环境条件的影响

土壤微生物的知识3

　　土壤微生物的分离和纯化